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  • 18S信号为阴性的原因
     

    没采集到细胞;采集的细胞已经裂解,经过样本处理后丢失了18SrRNA;样本未裂解充分;采集的样本中杂质太多,干扰18SrRNA扩增。

  • 阳性质控物检测时出现跳孔现象,即某个指标的检测值非常低。
     

    有两种可能:①特异探针漏加;②化学发光仪检测未充分预热出现问题,可以再读一遍发光值。

  • 杂交检测的本底过高(阴性质控物的检测值偏高,例如几千)的原因及如何解决。
     

    本底过高的原因有以下几种:①HRP酶联物孵育时间过长,或者孵育温度高于室温;②洗液B洗涤不充分,拍板没有拍干净;③底物配制错误,稀释倍数低于10倍。

    解决方案:洗液B重新洗涤3次,最后一次洗涤10分钟,拍干后倒扣在吸水纸上半分钟,然后再显色。

  • 阴性质控物相对发光值太低
     

    大家制定判断结果的依据是通过大量的研究试验,但并不是绝对的,当阴性质控物太低比如<10时,可根据日常经验进行判断。

  • 为什么要用化学发光法来判读结果?
     

    化学发光法是一种精确且成熟的检测方法,已被广大研究人员所认可并被国外各大医院广泛用于肿瘤和激素的检测,基于该方法的试剂与仪器均通过了美国FDA认证与我国药监局的批准。化学发光法具有灵敏度高、特异性强、试剂价格低廉、试剂稳定且有效期长(618个月)、方法稳定快速、检测范围宽、操作简单自动化程度高等优点。作为临床免疫检测最理想的新方法高,化学发光法正逐渐替代传统的生物检测技术。

  • 与其他厂家的恒温扩增法相比,有什么优势?
     

    实时荧光核酸恒温扩增检测技术(CPA)是将核酸恒温扩增和实时荧光检测相结合的一种核酸检测技术。其核酸扩增原理和步骤与本企业的产品大体上相同,只是在扩增体系中引入了带有荧光标记的探针,这些探针可以和扩增的RNA拷贝特异结合,产生荧光,从而被荧光检测仪器所捕获,进而反应扩增循环情况。虽然该技术有扩增效率高,反应时间短,灵敏度高,特异性高的特点,但是每一个反应体系只能检测一种特定的病原体。而本产品可以由一个反应体系同时检测7种不同的呼吸道病原体,从而节省了宝贵的临床诊断时间。

    产品名称

    七项呼吸道病原体核酸检测试剂盒

    (双扩增法)

    肺炎支原体(MP)核酸检测试剂盒(RNA恒温扩增)

    方法学

    双扩增法

    RNA恒温扩增

    病原体数量

    7

    1

    检测通量

    72

    96

    靶标-扩增模板-产物

    RNA-cDNA-RNA

    RNA-cDNA-RNA

    核酸提取

    不需要

    需要

    污染

    不易

    不易

    复制活跃期

    质量控制

    18srRNA样本内质控

    外加内质控

    仪器

    全自动化学发光分析仪

    荧光定量PCR


  • 与免疫荧光法的呼吸道病毒抗原7项检测试剂相比,有什么优势?
     

    呼吸道病毒7项检测的检测原理主要是免疫荧光技术,就是将不影响抗原抗体活性的荧光色素标记在抗体上,与其相应的抗原结合后,在荧光显微镜下呈现出一种特异荧光反应。首先从采集样本的步骤来看,需要采集病人的鼻咽上皮抽吸物和洗涤分泌物,如果采用拭子从鼻子、喉咙或者鼻咽部提取分泌物则会因为不含有足够的上皮细胞而无法进行检测。而本产品只需使用咽拭子采集管收集病人颚弓、咽及扁桃体处的脱落细胞,属于无创采集方法,病人比较容易接受。并且本产品所特有的双扩增技术可以少量样本的放大检测,从理论上来说,只需要5个细胞即可检测出靶标核酸;其次,免疫荧光法虽然有特异性强、敏感性高和速度快等优点,但是也存在非特异性染色的问题,并且样本在高压汞灯下照射超过3min,就有荧光减弱现象,经荧光染色的标本必须在当天观察,随着时间的延长,荧光强度会逐渐下降。而本产品采用的化学发光法是一种精确且成熟的检测方法,已被普遍认可并广泛用于许多病原体的检测。与依赖于主观判断的免疫荧光法不同的是,化学发光法是一种定量方法,其检测结果可以用发光信号测量仪来测量光子数量,并据此做出判断。

    产品名称

    七项呼吸道病原体核酸检测试剂盒

    (双扩增法)

    七项呼吸道病毒检测试剂盒

    (免疫荧光法)

    厂家

    必赢的官网网址生物

    美国Diagnostic Hybrids企业

    检测指标

    甲型流感病毒、乙型流感病毒、呼吸道合胞病毒、副流感病毒、腺病毒、肺炎支原体、肺炎衣原体

    流感病毒A、流感病毒B、呼吸道合胞病毒、腺病毒、副流感病毒1、副流感病毒2、副流感病毒3

    样本类型

    咽拭子

    鼻咽抽吸液和灌洗液

    检测靶标

    核酸(RNA

    抗原

    检测方法

    双扩增

    直接免疫荧光

    窗口期

    检测时长

    5小时

    3-4小时

    特异性

    较低

    灵敏度

    较低

    结果判读

    客观

    主观

    自动化

    配套仪器

    全自动化学发光免疫分析仪

    荧光显微镜

    开展实验室

    分子生物学实验室

    微生物实验室

    免疫学实验室

    微生物实验室

  • 与间接免疫荧光法的呼吸道病毒九联检相比,有什么优势?
     

    呼吸道病毒九联检的检测原理主要是检测人血清中呼吸道感染相关的主要病原体的IgM抗体,再通过间接免疫荧光法在荧光显微镜下判读结果。首先从采集样本的步骤来看,需要由专业人员进行无菌静脉穿刺采集血清样本,而本产品只需使用咽拭子采集管收集病人颚弓、咽及扁桃体处的脱落细胞,属于无创采集方法,病人比较容易接受;其次,间接免疫荧光法虽然有特异性强、敏感性高和速度快等优点,但是也存在非特异性染色的问题,同时在荧光显微镜下判读结果时主要由操编辑进行主观判定,没有一个客观的评判标准。而本产品采用的化学发光法是一种精确且成熟的检测方法,已被普遍认可并广泛用于许多病原体的检测。与依赖于主观判断的间接免疫荧光法不同的是,化学发光法是一种定量方法,其检测结果可以用发光信号测量仪来测量光子数量,并据此作出判断。

    产品名称

    七项呼吸道病原体核酸检测试剂盒

    (双扩增法)

    九项呼吸道感染病原体IgM抗体检测试剂盒

    呼吸道病原体谱抗体IgM检测试剂盒

    厂家

    必赢的官网网址生物

    西班牙VIRCELL,S.L

    德国欧蒙

    检测指标

    FluAFluBRSVPIVAdVMPCpn

    FluAFluBPIV 123型)、AdVRSVMPCpn、嗜肺军团菌血清1型、Q热立克次体

    FluAFluBRSVPIVAdVMPCpn及嗜肺军团菌

    样本类型

    咽拭子

    血清

    检测靶标

    核酸(RNA

    IgM抗体

    检测方法

    双扩增

    间接免疫荧光

    窗口期

    检测时长

    5小时

    3-4小时

    特异性

    较低

    灵敏度

    较低

    结果判读

    客观

    主观

    自动化

    配套仪器

    全自动化学发光免疫分析仪

    荧光显微镜

    开展实验室

    分子生物学实验室

    微生物实验室

    免疫学实验室

    微生物实验室

  • AMV与M-MLV有什么区别?
     

    来源不同:AMV来源于鸟类成髓细胞白血病病毒,M-MLV来自鼠白血病病毒。

    作用不同:AMV5-3’聚合酶活性,3-5RNaseH活性,降解DNA/RNA杂合体,不适合长片段,由2个多肽亚基组成,最适温度是42℃;M-MLVRNaseH活性很弱,最适温度是37℃,可合成更长片段,由单个多肽亚基组成。

  • T7酶的保真性能如何?
     

    理论上来说RNA转录的保真性不及DNA复制的保真性,但因为本企业产品设计的检测靶标序列很短,保真性差别带来的影响可以忽略。

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